Abstrakt
Přítomnost relevantní koncentrace kokainu a jeho metabolitů
v moči, jako následek zneužívání, se kvalitativně (pozitivní – negativní
výsledek) prokazuje pomocí rychlých imunochemických testů, většinou ve formě
různých testovacích destiček či proužků.
Odkazy na jiné relevantní dokumenty, další informace
Kokain
Kokain v moči (ABBOTT, AxSym)
Patofyziologické mechanismy ovlivňující koncentraci
Nadměrné vylučování moče například po velkém příjmu tekutin
nebo po aplikaci diuretik může způsobit pokles koncentrace metabolitů kokainu
pod cut-off hodnotu a tím negativní nález.
Obráceně nadměrné zakoncentrování moče např. v důsledku omezeného příjmu
tekutin, či velkého pocení při vysoké teplotě prostředí může způsobit pozitivní
nález.
Vliv na koncentraci konkrétního testovaného metabolitu (například
benzoylekgoninu) má i změna metabolizmu způsobená například současným
zneužíváním alkoholu, což způsobuje, že transesterifikací vzniká kokaethylen.
Terapeutické meze
Kokain má sice i léčebné využití například jako lokální anestetikum ale přitom se testování na přítomnost významné koncentrace kokainu a jeho metabolitů v moči prakticky neprovádí.
Přímé následky abnormálních koncentrací
Průkaz (pozitivní nález) relevantní koncentrace metabolitů kokainu v moči svědčí o zneužívání. Ke konečnému hodnocení je ale třeba přistupovat velmi opatrně, protože výsledek může být ovlivněn celou řadou faktorů. Pro definitivní potvrzení by po pozitivním nálezu mělo následovat stanovení kokainu a jeho metabolitů v moči nezávislou specifickou metodou založenou například na principu GC/MS apod.
Toxické meze
Za průkaz zneužívání kokainu se považuje pozitivní nález
(objeví se pouze jedna barevná linie a to v kontrolní oblasti C) u testovací
destičky většinou nastavené na cut-off koncentraci 150 případně 300 µg/l.
Tento pozitivní nález ovšem nerozliší, zda se jedná o aplikaci běžné dávky či o
předávkování kokainem.
Pozitivní nález ale umožní vysvětlení klinických projevů a umožňuje provést
cílenou terapii.
Omezení stanovení
Test je určen pro akutní
klinické případy, kdy umožní zvolit adekvátní terapii. Není vhodný pro soudně
lékařské a forenzní potřeby, pro které by výsledek testu musel být potvrzen
vhodnou kvantitativní a specifickou metodou založenou například na principu
GC/MS.
Při testování „zkušených“ uživatelů drog je nutné bezprostředně kontrolovat
odběr vzorku moče kvůli eliminaci eventuálních snah o ovlivnění výsledku
například naředěním vzorku moče vodou, přídavkem oxidujících (Savo),
redukujících nebo bělících látek či významnou úpravou pH moče. Vyloučena není
ani snaha o záměnu vzorku moče za vzorek spolu pacienta apod.
Použití ve výpočtech a odvozených parametrech
Znaky analytické metody
I když se jedná o kvalitativní průkaz, výrobci testovacích destiček většinou specifikují základní analytické znaky (správnost, specifičnost – zkříženou reaktivitu), které určují porovnáváním výsledků testovacích destiček s výsledky získanými referenční metodou založenou např. na principu GC/MS a to v moči, moči obsahující samotný kokain a jeho metabolity a v moči s současně přidanými jinými relevantními látkami.
Testovací destička je výrobci nastavena (volbou příslušné protilátky) většinou na jeden z hlavních metabolitů kokainu. Samotný kokain, jehož malé množství se v moči také nachází i ostatní metabolity by se musely vykytovat v moči v mnohem větších koncentracích aby způsobily pozitivní nález. Například destička Control Cocaine 008A116 vyráběná firmou ULTIMED udává následující koncentrace:
Látka |
Cut-off (µg/l) |
Benzoyelekgonin |
150 |
Kokain |
400 |
Kokaethylen |
6 250 |
Ekgonin |
12 500 |
Ekgonin methylester |
50 000 |
Obecný princip
používaných imunochemických testovacích destiček:
Test prokazuje přítomnost drogy,
tj. kokainu či jeho metabolitu (nejčastěji benzoylekgoninu) v moči. Konjugát
(benzoylekgonin-protein) imobilizovaný v membráně testovací destičky
soutěží kompetitivně s benzoylekgoninem event. přítomným v testované
moči o možnost navázaní se na omezené množství zlatem značených protilátek
nanesených na začátek testovací membrány. Barevné protilátky (anti-benzoylekgonin
monoclonal antibody) jsou spolu s močí posunovány po membráně. Pokud
v moči drogy nejsou, dostanou se nenavázané protilátky až k pásu konjugátů v oblasti
označené písmenem T (Test region) a vytvoří zde barevný pruh, což znamená
negativní výsledek testu. Pokud je v moči benzoylekgonin přítomný, navážou
se na něj protilátky hned na počátku membrány a k pásu konjugátů se již
jako volné nedostanou. V oblasti označené písmenem T proto žádný barevný
pás nevznikne, což znamená pozitivní výsledek testu. Podmínkou vydání výsledku
testu (pozitivní nebo negativní) je přítomnost barevného kontrolního pruhu
v oblasti membrány označené písmenem C (Control region). Ten vytvoří
reakce jiného systému antigen/protilátka přidávaného výrobcem do setu.
Kontrolní barevný pruh potvrzuje, že test byl proveden správně a že je funkční,
tj. že bylo na testovací destičku naneseno dostatečné množství moče a že se moč
dobře nasákla do celé plochy testovací membrány.
Vzhledem k riziku eventuální snahy vyšetřované osoby o ovlivnění výsledku – „falšování“ (pozitivní nález má pro vyšetřovaného většinou různé negativní důsledky) je vhodné dávat přednost těm testovacím systémům, které mimo vlastní testování přítomnosti drogy současně otestují základní spektrum potenciálních pokusů o ovlivnění (naředění moče, přídavek oxidujících, redukujících a bělicích látek, či výraznou úpravu pH moče).
Výhodná je také možnost poskytovaná některými výrobci a to naskenování naexponované destičky vhodným readerem a uložení vytvořeného obrázku v elektronické formě, což umožňuje eventuální pozdější dokladování či jiné využití.
Ekonomické náklady
Ekonomické náklady závisí
samozřejmě na zvoleném typu a výrobci testovacích destiček. Rozdílné jsou
náklady např. tehdy, když se použije sólo destička prokazující pouze kokain a
jeho metabolity (volí se většinou při cíleném prokazování zneužívání kokainu),
nebo zda se aplikuje skupinová destička s 5 nebo 10 testy současně (volí
se při screeningu drog, tj. když se prověřuje i eventuální přítomnost jiných drog).
Cena jedné destičky se obvykle pohybuje v rozmezí cca 50 – 400 Kč.
Příklady možných zdravotních výkonů VZP:
Název zdravotního výkonu |
Číslo výkonu |
Počet bodů |
Psychotropní látky imunochemicky jednotlivě |
99151 |
428 |
Drogy a léčiva – cílený imunochemický záchyt –STAT |
92135 |
492 |
Drogy a léčiva – cílený imunochemický záchyt. |
92133 |
406 |
Použití pro klinické účely
Průkaz relevantní koncentrace kokainu a jeho metabolitů
v moči je indikován při akutních klinických případech například
kardiologických problémů při současném podezření na to, že to může být následek
zneužívání kokainu.
Druhou relevantní aplikací je kontrola dodržování léčebného režimu u pacientů
prodělávajících odvykací léčbu.
Literatura
Poznámky
Relativně vysoká cena kokainu na ilegálním trhu způsobuje to, že kokain zneužívají především movitější vrstvy obyvatelstva. V posledních letech se v ČR, zřejmě vzhledem k zvyšování kupní síly, zneužívání kokainu rychle zvyšuje.
Appendixy
Autorské poznámky
Václav Senft (2008-12-17)