Abstrakt
Odměřování přesného objemu tekutin je
jednou z důležitých laboratorních činností. Na něm také významně závisí hodnota
výsledků analýz. Všechny volumetrické potřeby musí být bezpodmínečně čisté a
odmaštěné (vliv na odměřované objemy). Základní volumetrické sklo se dělí na
odměrné nádoby, odměrné válce a pipety. K odměřování objemů infekčního
biologického materiálu se používají automatické pipety s jednorázovými
špičkami. Důležitou roli mají rovněž různé typy dilutorů a zařízení pro přesné
dávkování objemů, které jsou součástí např. automatických analyzátorů.
Související
informace
Odměřování přesného objemu tekutin je
jednou z důležitých laboratorních činností. Na něm také významně závisí hodnota
výsledků analýz. Všechny volumetrické potřeby musí být bezpodmínečně čisté a
odmaštěné (vliv na odměřované objemy). Základní volumetrické sklo se dělí na
odměrné nádoby, odměrné válce a pipety.
Odměrné nádoby
Odměrné
nádoby slouží k přípravě roztoků přesné koncentrace, zejména standardních
roztoků. Do nádoby se vpraví přesně navážené nebo odměřené množství látky,
rozpustí se nebo zředí rozpouštědlem, které se pak doplní až ke značce u hrdla.
Tato značka udává obsah odměrné nádoby při určité teplotě. Limit chyby se
pohybuje od 0,2 % u 10 ml nádobky až do 0,025 % u nádob o deklarovaném
objemu 2 l.
Odměrné válce
Odměrné válce
se používají k odměřování libovolného množství tekutin. Mohou být cejchovány
"na obsah" (stupnice určuje skutečný obsah) nebo-na vyprázdnění"
(stupnice určuje, jakým objem se vylije při standardním způsobu vyprázdnění).
Přesnost měření objemů odměrnými válců je ve srovnání s odměmými nádobami o 1
řád menší.
Pipety
Základní typy pipet
Skleněné
pipety jsou trubice, používané k odměřování tekutin. Je mnoho druhů pipet podle
objemu, přesnosti a druhu odměřované tekutiny.
Dělené
(graduované) pipety jsou hladké, zpravidla skleněné trubice délky asi 30 cm,
umožňující odměření libovolného množství tekutiny.
Nedělené
("volumetrické") pipety mají pouze 1 plnící objem, určený ryskou na
skle pipety. Ke zmenšení délky mohou mít uprostřed rozšířený průměr, kdežto v
oblasti značky je objem úzký, aby bylo umožněno co nejpřesnější pipetování.
Pipety
mohou být kalibrovány, obdobně jako odměrné nádoby,"na obsah" a
"na vyprázdnění".
Bezpečnostní pipety
Jedovaté,
infekční a radioaktivní tekutiny, koncentrované kyseliny nebo louhy se nesmí
pipetovat ústy klasickými skleněnými pipetami. To platí pochopitelně pro krev a
její části, moč a další biologické tekutiny, neboť je nutno je považovat za
potenciálně infekční materiál. V současné době jsou k tomuto účelu
používány především automatické pístové pipety.
Pístové automatické pipety
Tyto pipety
slouží k odměřování objemů v rozsahu 1 – 1000 mikrolitrů i více. Používají se pipety s fixním objemem, nebo
pipety s kontinuálně nastavitelným objemem (pomocí mikrometrického šroubu).
Typická tolerance pístových pipet pro vodné roztoky je ± 1 %. Dávkování je prováděno tlačítkem,
které pohybuje pístem ve válci pipety. Vzorek je nabírán do nesmáčivé
(polypropylenové) vyměnitelné špičky, takže nepřichází do styku
s pipetovacím mechanismem.
Tlačítko automatické pipety
má tři polohy. V klidu je tlačítko v nejvyšší pozici a lze je postupně stlačit
ke kalibrační zarážce a k dolní zarážce.
Pipetovat je možno dvěma
způsoby:
A. Píst se stlačí pouze ke kalibrační zarážce, špička se
ponoří do tekutiny, která má byt nabrána, a naplní se uvolněním
tlačítka do klidové polohy. Vzorek se vytlačí stisknutím tlačítka ke kalibrační
zarážce (špička se tím téměř úplně vyprázdní). Následným úplným stlačením až k
dolní zarážce se vytlačí zbytek tekutiny ze špičky.
B. Tlačítko se stiskne úplně až k dolní zarážce, tekutina
se nabere uvolněním tlačítka po ponoření špičky. Vytlačení kalibrovaného objemu
tekutiny se provede stisknutím tlačítka pouze ke kalibrační zarážce.
Přebytečná tekutina zůstává ve špičce.
Dilutory
Tyto typy zařízení obsahují
oddělené stříkačky pro vzorek a činidlo. Dilutory jsou obvykle doplněny
mikroprocesorem, který umožňuje uložení dat (objem vzorku, objem činidla, počet
činidel, opakování dávkování, sériová ředění apod.) a jejich vyvolání pod
kódovým číslem.
Autorské
poznámky