Abstrakt
Komplement-fixační reakce je serologická metoda, při
které se přítomnost protilátek proti příslušnému antigenu prokazuje vyvazováním komplementu na
komplexy antigen-protilátka.
Související informace
Text
Princip reakce je relativně složitý lze jej nejlépe
popsat ve 4 krocích s uvedením průběhu v případě pozitivní a negativní reakce.
1. smísí se zkoumané sérum v němž byl inaktivován
vlastní komplement a příslušný antigen Poz.: vzniknou komplexy antigen-protilátka Neg.: komplexy
antigen-protilátka nevzniknou
2. přidá se morčecí komplement (tradičně nazývaný
alexin) Poz.: komplement se vyváže na komplexy antigen-protilátka Neg.: komplement se nevyváže a
je nadále aktivní
3. mimo reakci se připraví tzv. hemolytický systém, t.j.
ovčí krvinky s navázavými protilátkami proti těmto (zdrojem protilátek je
obvykle králičí antisérum proti ovčím krvinkám tradičně nazývané amboceptor)
4. do reakce se přidá hemolytický systém Poz.: komplement je vyvázán a
neaktivní a nedojde k hemolýze Neg.: komplement se vyváže na hemolytický systém
(vlastně komplexy antigen-protilátka) a dojde k hemolýze
Většinou se reakce hodnotí pouze kvalitativně a provádí
se v několika ředěních séra. Jako výsledek se udává nejvyšší ředění séra (tzv. titr,
tradičně ve formě 1:xxx) při kterém ještě nedošlo k hemolýze.
Výhody - nízká cena a nenáročnost na vybavení laboratoře - vysoká citlivost (cca 0.1 ug)
Nevýhody - nemožnost rozlišit jednotlivé třídy protilátek - náročnost provedení a
pracnost - používání nepřesně definovaných a nestandardních reagencií
Poznámky
Appendixy
Literatura
LG/150/0045
Autorské poznámky
Revidováno
a upraveno, 22.3.2001, MUDr. Pavel Žampach, RNDr. Ivo Lochman