Abstrakt
Odměřování přesného objemu tekutin je jednou z
důležitých laboratorních činností. Na něm také významně závisí hodnota výsledků
analýz. Všechny volumetrické potřeby musí být bezpodmínečně čisté a odmaštěné
(vliv na odměřované objemy). Základní volumetrické sklo se dělí na odměrné
nádoby, odměrné válce a pipety. K odměřování objemů infekčního
biologického materiálu se používají automatické pipety s jednorázovými
špičkami. Důležitou roli mají rovněž různé typy dilutorů a zařízení pro přesné
dávkování objemů, které jsou součástí např. automatických analyzátorů.
Související informace
Odměřování přesného objemu tekutin je jednou z
důležitých laboratorních činností. Na něm také významně závisí hodnota výsledků
analýz. Všechny volumetrické potřeby musí být bezpodmínečně čisté a odmaštěné
(vliv na odměřované objemy). Základní volumetrické sklo se dělí na odměrné
nádoby, odměrné válce a pipety.
Odměrné nádoby
Odměrné nádoby slouží k
přípravě roztoků přesné koncentrace, zejména standardních roztoků. Do nádoby se
vpraví přesně navážené nebo odměřené množství látky, rozpustí se nebo zředí
rozpouštědlem, které se pak doplní až ke značce u hrdla. Tato značka udává
obsah odměrné nádoby při určité teplotě. Limit chyby se pohybuje od 0,2 %
u 10 ml nádobky až do 0,025 % u nádob o deklarovaném objemu 2 l.
Odměrné válce
Odměrné válce se používají k
odměřování libovolného množství tekutin. Mohou být cejchovány "na
obsah" (stupnice určuje skutečný obsah) nebo-na vyprázdnění"
(stupnice určuje, jakým objem se vylije při standardním způsobu vyprázdnění).
Přesnost měření objemů odměrnými válců je ve srovnání s odměmými nádobami o 1
řád menší.
Základní typy pipet
Skleněné
pipety jsou trubice, používané k odměřování tekutin. Je mnoho druhů pipet podle
objemu, přesnosti a druhu odměřované tekutiny.
Dělené
(graduované) pipety jsou hladké, zpravidla skleněné trubice délky asi 30 cm,
umožňující odměření libovolného množství tekutiny.
Nedělené
("volumetrické") pipety mají pouze 1 plnící objem, určený ryskou na
skle pipety. Ke zmenšení délky mohou mít uprostřed rozšířený průměr, kdežto v
oblasti značky je objem úzký, aby bylo umožněno co nejpřesnější pipetování.
Pipety
mohou být kalibrovány, obdobně jako odměrné nádoby,"na obsah" a
"na vyprázdnění".
Bezpečnostní pipety
Jedovaté, infekční a
radioaktivní tekutiny, koncentrované kyseliny nebo louhy se nesmí pipetovat
ústy klasickými skleněnými pipetami. To platí pochopitelně pro krev a její
části, moč a další biologické tekutiny, neboť je nutno je považovat za
potenciálně infekční materiál. V současné době jsou k tomuto účelu
používány především automatické pístové pipety.
Pístové automatické pipety
Tyto pipety slouží
k odměřování objemů v rozsahu 1 – 1000 ml i více. Používají se pipety s fixním objemem, nebo
pipety s kontinuálně nastavitelným objemem (pomocí mikrometrického šroubu).
Typická tolerance pístových pipet pro vodné roztoky je ± 1 %. Dávkování je prováděno tlačítkem, které
pohybuje pístem ve válci pipety. Vzorek je nabírán do nesmáčivé
(polypropylenové) vyměnitelné špičky, takže nepřichází do styku
s pipetovacím mechanismem.
Tlačítko automatické pipety
má tři polohy. V klidu je tlačítko v nejvyšší pozici a lze je postupně stlačit
ke kalibrační zarážce a k dolní zarážce.
Pipetovat je možno dvěma
způsoby:
A.
Píst se stlačí pouze ke
kalibrační zarážce, špička se ponoří do tekutiny, která má byt nabrána,
a naplní se uvolněním tlačítka do klidové polohy. Vzorek se vytlačí
stisknutím tlačítka ke kalibrační zarážce (špička se tím téměř úplně
vyprázdní). Následným úplným stlačením až k dolní zarážce se vytlačí zbytek
tekutiny ze špičky.
B.
Tlačítko se stiskne
úplně až k dolní zarážce, tekutina se nabere uvolněním tlačítka po ponoření
špičky. Vytlačení kalibrovaného objemu tekutiny se provede stisknutím tlačítka
pouze ke kalibrační zarážce. Přebytečná tekutina zůstává ve špičce.
Dilutory
Tyto typy zařízení obsahují
oddělené stříkačky pro vzorek a činidlo. Dilutory jsou obvykle doplněny
mikroprocesorem, který umožňuje uložení dat (objem vzorku, objem činidla, počet
činidel, opakování dávkování, sériová ředění apod.) a jejich vyvolání pod
kódovým číslem.
Autorské poznámky