Mikrobiologická  vyšetření v NČLP a DS

 

Laboratorní vyšetření používaná v mikrobiologii lze z pohledu NČLP rozdělit do 4 základních skupin (toto dělení však vychází z principu těchto vyšetření a je užitečné a životaschopné i mimo rámec NČLP):

 

1. Kultivační vyšetření

(ať už všeobecná, speciální nebo selektivní) hledají živého mikroba a jejich výsledek má (proti jiným typům vyšetření) složitou a specifickou strukturu (žádný, jeden či více mikrobů, jejich vlastnosti, jejich kvantita, citlivost na antimikrobní látky atd.). Tento typ výsledku je pro mikrobiologická kultivační vyšetření specifický a kultivační vyšetření neodpovídají přesně specifikaci IFCC.

Rozdíl mezi všeobecným a selektivním kultivačním vyšetřením spočívá v tom, že u selektivního vyšetření („na konkrétního mikroba“) je součástí výsledku (případně) i informace o nepřítomnosti hledaného mikroba (výsledkem speciální kultivace na M. tuberculosis může být jen „kvasinky“, ale výsledek musí obsahovat fakt, že M. tuberculosis nebylo prokázáno).

 

Příklady:

Systém:            punktát, moč, sekret z tonsil…

Komponenta:     agens (obecná, víceméně formální položka)

Druh veličiny:     popis

Jednotka:          není

Procedura:        kultivace bakteriologická

                        kultivace bakteriologická na mykobakteria

                        kultivace virologická…

 

Začlenění kultivačních vyšetření do NČLP byl největší problém, jejich struktura se vzpírala exaktnímu popisu (problém není uspokojivě vyřešen ani v obdobných zahraničních systémech) a dosažený stav je víceméně kompromisem mezi „šedou teorií“ a „zeleným stromem života“. Tyto položky jsou v NČLP označeny jako „ne-IFCC“, jsou trochu výjimečné, autoři se však domnívají, že toto řešení vyhovuje praktickým potřebám (přenos dat, vypracování SOP, vypracování laboratorní příručky).

Zároveň při práci vyšlo najevo, že mikrobiologická kultivační vyšetření a tzv. „přímé průkazy“ (viz dále) jsou metody, kde je více než v jiných laboratorních oborech kladen důraz na přesný popis a specifikaci systému („materiálu“). Do číselníku systému byla proto zavedena celá řada nových položek, které jiné laboratorní obory nepoužívají (stěr z tonsil…), zavedena specifikace systémů (tj. další dělení pro některé systémy) a přibyla možnost přidat k popisu systému i způsob jeho získání. Tyto změny byly pro strukturu NČLP dosti významné a bez nich by kultivační metody nebyly popsány vyhovujícím způsobem.

Rozšířen musel být pochopitelně i číselník procedur, ale zde změny z hlediska struktury NČLP nebyly podstatné a jednalo se o běžné doplnění nových procedur.

Z hlediska datového standardu jsou položky tohoto typu odlišné a zachází se s nimi jinak, než s „běžnými“ položkami NČLP (dále v bodě 3. a 4.).

 

2. Mikroskopie

popisuje morfologii mikroskopického preparátu (leukocyty, fagocytózu, G- diplokoky)

 

Příklady:

Systém:            punktát, moč, sekret z tonsil…

Komponenta:     agens (obecná, víceméně formální položka)

Druh veličiny:     popis

Jednotka:          není

Procedura:        mikroskopie optická, barvení dle Grama

                        mikroskopie fluorescenční na průkaz mykobakterií

 

Oddělení mikroskopických a kultivačních metod (což bude možná pro mikrobiologickou veřejnost trochu překvapivé) celou problematiku paradoxně zjednodušuje. Kultivační a mikroskopické metody se sice většinou provádějí paralelně (hlavně v bakteriologii, situace v para­zi­tologii je ale už poněkud odlišná), ale jinak se v řadě aspektů odlišují. Např. se zcela liší jejich SOP. Pro systémy a procedury platí totéž, co bylo řečeno v souvislosti s kultivačními metodami.

Z hlediska datového standardu jsou položky tohoto typu odlišné a zachází se s nimi jinak, než s „běžnými“ položkami NČLP – viz níže.

 

3. „Přímé průkazy“

jedná se o řadu metod, kterými prokazujeme různé součásti konkrétního mikroba. Patří sem zejména imunochemické metody prokazující antigeny a molekulárně-genetické metody prokazující nukleovou kyselinu. V principu se tento typ metod zásadně odlišuje od kultivačních vyšetření, metody jsou dobře popsatelné klasickým schématem Systém-komponenta-procedura, jejich výsledek má jednoduchou strukturu (přítomno-nepřítomno, případně množství). S kultivačními metodami však mají společný důraz na přesný popis a specifikaci systému („materiálu“).

 

Příklady:

Systém:            punktát, moč, sekret z tonsil…

Komponenta:     konkrétní antigen konkrétního mikroba, sekvence NK konkrétního mikroba

druh veličiny:     koncentrace (kvantitativní metody) příp. detekce (kvalitativní metody

jednotka:           µg/l, počet kopií NK/ml,  semikvantitativní vyjádření („křížky“)

Procedura:        mikroskopie fluorescenční, EIA, latexaglutinace, PCR, LCR…

                       

Tyto položky mají standardní strukturu a z hlediska datového standardu nepředstavují žádnou výjimku.

 

4. Sérologie

zjišťuje protilátky, čili reakci makroorganizmu na infekci. Jsou dobře popsatelné klasickým schématem Systém-komponenta-procedura, výsledek má jednoduchou strukturu (přítomno-nepřítomno, případně množství). Řada (snad dokonce většina) potřebných položek je již v NČLP vypracována.

 

Příklady:

Systém:            sérum, plazma (pro kompatibilitu s IFCC)

Komponenta:     protilátky proti konkrétnímu mikrobu

                        (možná specifikace antigenu a třídy protilátek)

druh veličiny:     koncentrace (kvantitativní metody) příp. detekce (kvalitativní metody)

jednotka:           titry, semikvantitativní vyjádření („křížky“)

Procedura:        mikroskopie fluorescenční, EIA, KFR, aglutinace…

 

Tyto položky mají standardní strukturu a z hlediska datového standardu nepředstavují žádnou výjimku.

 

 

Kultivační a mikroskopická vyšetření z hlediska datového standardu

 

Následující text se týká pouze kultivačních a mikroskopických vyšetření (body 1 a 2 v předchozím textu); tyto položky jsou typické tím, že jejich komponentou je „agens“.

Objednávání těchto vyšetření se děje standardně pomocí příslušných položek NČLP, jen zde opět připomínáme, že kultivační a mikroskopická vyšetření jsou oddělena a je nutno je objednávat zvlášť. Tyto položky NČLP slouží z hlediska DS pouze k objednávání a nelze je používat pro sdělování výsledků. K objednávaným položkám NČLP lze připojit ještě „specifikaci objednávky“, což je přídatná fakultativní  informace o dalších požadavcích (typicky např. „Zhotovení autovakcíny“).

Export výsledků těchto vyšetření je řešen specifickým způsobem. Důvodem tohoto netypického řešení je snaha soustředit všechna kultivační a mikroskopická vyšetření do jednoho bloku, což umožňuje vytvoření logického celku a společnou interpretaci těchto vyšetření; bez významu není ani to, že tento způsob lépe odpovídá tradičnímu pohledu mikrobiologie.

Základem pro sdělování výsledků je formální informatická položka „Výsledek mikrobiologického kultivačního a mikroskopického vyšetření“, která je vytvořena pro každý systém („materiál“), který je označen jako používaný v mikrobiologii (ať již výhradně nebo sdílen s jinými obory). V této položce se sumarizují výsledky všech vyšetření, která mají stejný systém a komponentu (=AGENS). Sděluje se prostřednictvím bloku vrk datového standardu.

Výsledky mikroskopických vyšetření jsou v elementu vrmmn, který se může opakovat v případě, že bylo provedeno více mikroskopických vyšetření (např. běžná mikroskopie a mikroskopie na průkaz acidorezistetntních tyček).

Jednotlivé mikroby (obecně „agens“) izolované a identifikované ze vzorku jsou popsány v bloku vrkpa, který se pochopitelně může opakovat. V tomto bloku jsou obsaženy i výsledky citlivostí na jednotlivé antimikrobní látky.

Celý způsob sdělování výsledků mikrobiologických vyšetření bychom chtěli demonstrovat na následujících dvou příkladech. Jedná se jen o vlastní sdělení nálezu, údaje o identifikaci vzorku (jméno pacienta, čas odběru, čas sdělení) jsou záměrně opomenuty – jsou řešeny v obecných částech DS a jsou stejná pro vyšetření ve všech oborech. Při přepisu výsledků vyšetření není použit jazyk XML, ve kterém je DS implementován – pro laika je poněkud nepřehledný a pro odborníka je přepis do XML triviální záležitostí.

 

 

Příklad č. 1 – vyšetření stolice

 

Část výsledkového listu:

KULTIVACE A CÍLENÁ VYŠETŘENÍ:

 

Základní kultivační vyšetření:

 

1.        Escherichia coli

2.        Salmonella enteritidis

 

Kultivační průkaz kampylobakterů:               negativní

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Citlivost k antibiotikům:                   konečný výsledek

 

antibiotikum                          kmen 2

 

ampicilin                                C

chloramfenikol                      C

tetracyklin                             C

ko-trimoxazol                         C

ciprofloxacin                         X

 

Legenda:               C - citlivý, I - hraniční citlivost, R - rezistentní, X - výsledek k dispozici po konzultaci

 

Poznámka:            Terapeutická záměna antibiotik podle výsledku testu citlivosti je součástí laboratorní příručky. Hodnota MIC je k dispozici v laboratoři na vyžádání. Indikace u nichž laboratoř provádí stanovení MIC uvádí laboratorní příručka.

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Závěr (klinicko mikrobiologické hodnocení nálezu): Nález odpovídá infekčnímu průjmu salmonelové etiologie.

Doporučení: Při nekomplikovaném průběhu není vhodná léčba antibiotiky.

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Hodnocení validity vzorku: Plná klinická i technická validita.

 

Konec části výsledkového listu.

 

Toto vyšetření bylo objednáno jako:

F_AGENS_CACABA (klíč NČLP:11892)

 

Bude sdělováno prostřednictvím položky:

F_AGENS_DTP (klíč NČLP: 20694)

 

Přepis výsledků do DS:

 

nazvy                                     viz popis DS

spec_kod                               F

spec_text                               prázdné

subspec_text                        prázdné

ziskmat_kod                          prázdné

ziskmat_text                          prázdné

lopok                                      prázdné

stav_mat                                prázdné

stav_zprac                             A

vrmmn                                    prázdné

vrkpa

                agens_kod                            CAMPJEJE

                agens_text                             Campylobacter jejuni subsp. jejuni

                dal_vys                                  prázdné

                pritomnost                             N

                priznak                                   prázdné

                kvantita                                  prázdné

                druh_veliciny                       prázdné

                jednotka                 prázdné

                vrav                                        prázdné

                vrac                                        prázdné

                dourceni                                prázdné

                vrmahn                                   prázdné

                vrmpln                                    prázdné

                vzmzhl                                    prázdné

vrkpa

                agens_kod                            ESCHCOLI

                agens_text                             Escherichia coli

                dal_vys                                  prázdné

                pritomnost                             P

                priznak                                   prázdné

                kvantita                                  prázdné

                druh_veliciny                       prázdné

                jednotka                 prázdné

                vrav                                        prázdné

                vrac                                        prázdné

                dourceni                                prázdné

                vrmahn                                   prázdné

                vrmpln                                    prázdné

                vzmzhl                                    prázdné

vrkpa

                agens_kod                            SALMENTE

                agens_text                             Salmonella enteritidis

                dal_vys                                  prázdné

                pritomnost                             P

                priznak                                   prázdné

                kvantita                                  prázdné

                druh_veliciny                       prázdné

                jednotka                 prázdné

                vrav                                        prázdné

                vrac

                                latka_kod                               AMP

                                latka_text                               ampicilin

                                hod_citlivosti                       C

                                priznak                                   prázdné

                                kvantita                                  prázdné

                vrac

                                latka_kod                               CMP

                                latka_text                               chloramfenikol

                                hod_citlivosti                       C

                                priznak                                   prázdné

                                kvantita                                  prázdné

                vrac

                                latka_kod                               TET

                                latka_text                               tetracyklin

                                hod_citlivosti                       C

                                priznak                                   prázdné

                                kvantita                                  prázdné

                vrac

                                latka_kod                               COT

                                latka_text                               kotrimoxazol

                                hod_citlivosti                       C

                                priznak                                   prázdný

                                kvantita                                  prázdný

                vrac

                                latka_kod                               CIP

                                latka_text                               ciprofloxacin

                                hod_citlivosti                       L

                                priznak                                   prázdný

                                kvantita                                  prázdný

                dourceni                                prázdné

                vrmahn                                   prázdné

                vrmpln                                    prázdné

                vzmzhl                                    prázdné

vrmahn                                   prázdné

vrmlpn                                   Terapeutická záměna antibiotik podle výsledku testu citlivosti je součástí laboratorní příručky (intranet: http//:www.homolka.mbio.cz). Hodnota MIC je k dispozici v laboratoři na vyžádání. Indikace u nichž laboratoř provádí stanovení MIC uvádí laboratorní příručka

vrmzhl                                    Nález odpovídá infekčnímu průjmu salmonelové etiologie.

Doporučení: Při nekomplikovaném průběhu není vhodná léčba antibiotiky

 

 


 

Příklad č. 2 – vyšetření bronchoalveolární laváže

 

Část výsledkového listu:

MIKROSKOPIE

 

Mikroskopické vyšetření - barvení podle Grama

 

dlaždicové epitelie:                               nenalezeno

cylindrické epitelie:                              +

hlenová vlákna:                                    +

polymorfonukleální leukocyty:          ++

grampozitivní koky ve shlucích         ++

gramnegativní tyčinky                         ojediněle

 

Hodnocení: Purulentní obraz s převládajícím podílem grampozitivních koků ve shlucích.

 

Mikroskopické hodnocení podílu infikovaných leukocytů - barvení podle Giemsy

 

Podíl infikovaných leukocytů:                                           6/100

Morfologie fagocytovaných mikroorganismů:                grampozitivní koky ve shlucích

 

Hodnocení: Nález je charakteristický pro bakteriální infekci dolních cest dýchacích, mikrobiální morfotyp odpovídá stafylokokové etiologii

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

KULTIVACE A CÍLENÁ VYŠETŘENÍ:

 

Základní kvantitativní kultivační vyšetření

 

3.        Staphylococcus aureus                                              106

4.        Pseudomonas aeruginosa                                          102

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Citlivost k antibiotikům:                   konečný výsledek

 

antibiotikum                          kmen 1    kmen 2   

 

oxacilin                                   C

piperacilin                                              X

ceftazidim                                              X

imipenem                                               X

gentamicin                             C             X

netilmicin                                               X

tobramycin                                            X

amikacin                                 X

ciprofloxacin                         X             X

erytromycin                           X

klindamycin                           C

vankomycin                          X

chloramfenikol                      X

tetracyklin                             X

kotrimoxazol                          X

rifampicin                               X

kolistin                                                   X

 

Legenda:               C - citlivý, I - hraniční citlivost, R - rezistentní, X - výsledek k dispozici po konzultaci

 

Poznámka:            Terapeutická záměna antibiotik podle výsledku testu citlivosti je součástí laboratorní příručky. Hodnota MIC je k dispozici v laboratoři na vyžádání. Indikace u nichž laboratoř provádí stanovení MIC uvádí laboratorní příručka.

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Závěr (klinicko mikrobiologické hodnocení nálezu): Nález je suspektní pro infekci dolních cest dýchacích vyvolanou Staphylococcus aureus, kmenem citlivým k oxacilinu.

Doporučení: Zhodnocení klinického významu nálezu a konzultace léčebného postupu.

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Hodnocení validity vzorku: Plná klinická i technická validita.

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Konec části výsledkového listu.

 

Toto vyšetření bylo objednáno jako:

LABRAL_AGENS_CAGEN

LABRAL_AGENS_MAGEN

 

Bude sdělováno prostřednictvím položky:

LABRAL_AGENS_DTP

 

Přepis výsledků do DS:

 

nazvy                                     viz popis DS

spec_kod                               LABRAL

spec_text                               prázdné

subspec_text                        pravá plíce

ziskmat_kod                          prázdné

ziskmat_text                          prázdné

lopok                                      prázdné

stav_mat                                prázdné

stav_zprac                             A

vrmmn                                    Mikroskopické vyšetření - barvení podle Grama

 

dlaždicové epitelie:                               nenalezeno

cylindrické epitelie:                                               +

hlenová vlákna:                                                     +

polymorfonukleální leukocyty:                           ++

grampozitivní koky ve shlucích          ++

gramnegativní tyčinky                                         ojediněle

 

Hodnocení: Purulentní obraz s převládajícím podílem grampozitivních koků ve shlucích.

vrmmn                                   Mikroskopické hodnocení podílu infikovaných leukocytů - barvení podle Giemsy

 

Podíl infikovaných leukocytů:                                            6/100

Morfologie fagocytovaných mikroorganismů:                grampozitivní koky ve shlucích

 

Hodnocení: Nález je charakteristický pro bakteriální infekci dolních cest dýchacích, mikrobiální morfotyp odpovídá stafylokokové etiologii

vrkpa

                agens_kod                            STAPAUAU

                agens_text                             Staphylococcus aureus subsp. aureus

                dal_vys                                  prázdné

                pritomnost                             P

                priznak                                   prázdné

                kvantita                                  1000000

                druh_veliciny                       prázdné

                jednotka                 prázdné

                vrav                                        prázdné

                vrac

                                latka_kod                               OXA

                                latka_text                               oxacilin

                                hod_citlivosti                       C

                                priznak                                   prázdné

                                kvantita                                  prázdné

                vrac

                                latka_kod                               GEM

                                latka_text                               gentamicin

                                hod_citlivosti                       C

                                priznak                                   prázdné                 

                                kvantita                                  prázdné

                vrac

                                latka_kod                               CIP

                                latka_text                               ciprofloxacin

                                hod_citlivosti                       L

                                priznak                                   prázdné

                                kvantita                                  prázdné

                vrac

                                latka_kod                               ERY

                                latka_text                               erytromycin

                                hod_citlivosti                       L

                                priznak                                   prázdné

                                kvantita                                  prázdné

                vrac

                                latka_kod                               CLI

                                latka_text                               klindamycin

                                hod_citlivosti                       C

                                priznak                                   prázdné

                                kvantita                                  prázdné

                vrac

                                latka_kod                               VAN

                                latka_text                               vankomycin

                                hod_citlivosti                       L

                                priznak                                   prázdné

                                kvantita                                  prázdné

                vrac

                                latka_kod                               CMP

                                latka_text                               chloramfenikol

                                hod_citlivosti                       L

                                priznak                                   prázdné

                                kvantita                                  prázdné

                vrac

                                latka_kod                               TET

                                latka_text                               tetracyklin

                                hod_citlivosti                       L

                                priznak                                   prázdné

                                kvantita                                  prázdné

                vrac

                                latka_kod                               COT

                                latka_text                               kotrimoxazol

                                hod_citlivosti                       L

                                priznak                                   prázdné

                                kvantita                                  prázdné

                vrac

                                latka_kod                               RIF

                                latka_text                               rifampicin

                                hod_citlivosti                       L

                                priznak                                   prázdné

                                kvantita                                  prázdné

                dourceni                                prázdné

                vrmahn                                   prázdné

                vrmpln                                    prázdné

                vzmzhl                                    prázdné

vrkpa

                agens_kod                            PSEUAERU

                agens_text                             Pseudomonas aeruginosa

                dal_vys                                  prázdné

                pritomnost                             P

                priznak                                   prázdné

                kvantita                                  100

                druh_veliciny                       prázdné

                jednotka                 prázdné

                vrav                                        prázdné

                vrac

                                latka_kod                               PIP

                                latka_text                               piperacilin

                                hod_citlivosti                       L

                                priznak                                   prázdné

                                kvantita                                  prázdné

                vrac

                                latka_kod                               CTZ

                                latka_text                               ceftazidim

                                hod_citlivosti                       L

                                priznak                                   prázdné

                                kvantita                                  prázdné

                vrac

                                latka_kod                               IMI

                                latka_text                               imipenem

                                hod_citlivosti                       L

                                priznak                                   prázdné

                                kvantita                                  prázdné

                vrac

                                latka_kod                               GEN

                                latka_text                               gentamicin

                                hod_citlivosti                       L

                                priznak                                   prázdný

                                kvantita                                  prázdný

                vrac

                                latka_kod                               NET

                                latka_text                               netilmicin

                                hod_citlivosti                       L

                                priznak                                   prázdný

                                kvantita                                  prázdný

                vrac

                                latka_kod                               TOB

                                latka_text                               tobramycin

                                hod_citlivosti                       L

                                priznak                                   prázdný

                                kvantita                                  prázdný

                vrac

                                latka_kod                               AMI

                                latka_text                               amikacin

                                hod_citlivosti                       L

                                priznak                                   prázdný

                                kvantita                                  prázdný

                vrac

                                latka_kod                               CIP

                                latka_text                               ciprofloxacin

                                hod_citlivosti                       L

                                priznak                                   prázdný

                                kvantita                                  prázdný

                vrac

                                latka_kod                               COL

                                latka_text                               kolistin

                                hod_citlivosti                       L

                                priznak                                   prázdný

                                kvantita                                  prázdný

                dourceni                                prázdné

                vrmahn                                   prázdné

                vrmpln                                    prázdné

                vzmzhl                                    prázdné

vrmahn                                   prázdné

vrmlpn                          Terapeutická záměna antibiotik podle výsledku testu citlivosti je součástí laboratorní příručky (intranet: http//:www.homolka.mbio.cz). Hodnota MIC je k dispozici v laboratoři na vyžádání. Indikace u nichž laboratoř provádí stanovení MIC uvádí laboratorní příručka

vrmzhl                                    Nález je suspektní pro infekci dolních cest dýchacích vyvolanou Staphylococcus aureus, kmenem citlivým k oxacilinu.

Doporučení: Zhodnocení klinického významu nálezu a konzultace léčebného postupu.

 

.