Abstrakt
Přítomnost relevantní koncentrace metamfetaminu a jeho
metabolitu amfetaminu v moči, jako následek zneužívání, se kvalitativně
(pozitivní – negativní výsledek) prokazuje pomocí rychlých imunochemických
testů, většinou ve formě různých testovacích destiček či proužků.
Odkazy na jiné relevantní dokumenty, další informace
Patofyziologické mechanismy ovlivňující koncentraci
Nadměrné vylučování moče například po velkém příjmu tekutin
nebo po aplikaci diuretik může způsobit pokles koncentrace metamfetaminu pod
cut-off hodnotu a tím negativní nález.
Obráceně nadměrné zakoncentrování moče např. v důsledku omezeného příjmu
tekutin, či velkého pocení při vysoké teplotě prostředí může způsobit pozitivní
nález.
Vliv na koncentraci metamfetaminu v moči má i pH moči. Při nižším pH
(kyselá moč) se koncentrace metamfetaminu v moči zvyšuje, při vyšším pH
(alkalická moč) se snižuje.
Terapeutické meze
Sice existovalo i terapeutické využití, ale mnohem
významnější je v současnosti problematika zneužívání metamfetaminu
(pervitinu) jako drogy.
Přímé následky abnormálních koncentrací
Průkaz (pozitivní nález) relevantní koncentrace metamfetaminu v moči svědčí o zneužívání. Ke konečnému hodnocení je ale třeba přistupovat velmi opatrně, protože výsledek může být ovlivněn celou řadou faktorů. Pro definitivní potvrzení by po pozitivním nálezu mělo následovat stanovení metamfetaminu v moči nezávislou specifickou metodou založenou například na principu GC/MS apod.
Toxické meze
Za průkaz zneužívání amfetaminu se považuje pozitivní nález
(objeví se pouze jedna barevná linie a to v kontrolní oblasti C) u testovací
destičky, většinou nastavené na cut-off koncentraci 1000, případně 500 µg/l.
Pozitivní nález umožní vysvětlení klinických projevů u testovaného pacienta a
umožňuje provést cílenou terapii. Metamfetamin je možné zachytit v moči po
dobu 2 – 4 dnů po aplikaci významné dávky.
Omezení stanovení
Test je určen pro akutní
klinické případy, kdy umožní zvolit adekvátní terapii. Není vhodný pro soudně
lékařské a forenzní potřeby, pro které by výsledek testu musel být potvrzen
vhodnou kvantitativní a specifickou metodou založenou například na principu
GC/MS.
Při testování „zkušených“ uživatelů drog je nutné bezprostředně kontrolovat
odběr vzorku moči kvůli eliminaci eventuálních snah o ovlivnění výsledku
například naředěním vzorku moči vodou, přídavkem oxidujících (Savo),
redukujících nebo bělících látek, či významnou úpravou pH moče. Vyloučena není
ani snaha o záměnu vzorku moči za vzorek spolu pacienta apod.
Použití ve výpočtech a odvozených parametrech
Znaky analytické metody
I když se většinou jedná o kvalitativní průkaz, výrobci testovacích destiček většinou specifikují základní analytické znaky (správnost, specifičnost – zkříženou reaktivitu), které určují porovnáváním výsledků testovacích destiček s výsledky získanými referenční metodou založenou např. na principu GC/MS a to v moči, moči obsahující samotný metamfetamin a jeho metabolity a v moči s současně přidanými jinými relevantními látkami.
Testovací destička je výrobci nastavena (volbou příslušné protilátky) většinou přímo na metamfetamin, případně na metabolit amfetamin. Ostatní relevantní látky by se musely vyskytovat v moči v mnohem větších koncentracích, aby způsobily pozitivní nález. Například destička ControlÒ Metamfetamine 008Z112 vyráběná firmou ULTIMED udává následující koncentrace:
Látka |
Hladina (µg/l) |
% reaktivity |
Hydroxymetamfetamin |
30 000 |
3 |
D-metamfetamin |
1 000 |
100 |
L-metamfetamin |
8 000 |
12,5 |
Methylendioxymetamfetamin (MDMA = extáze) |
2 000 |
50 |
Pozn.: Z tabulky je patrná event. možnost vyvolání pozitivního nálezu zkříženou reakcí MDMA.
Obecný princip
používaných imunochemických testovacích destiček:
Test prokazuje přítomnost drogy,
metamfetaminu či jeho metabolitu amfetaminu v moči. Konjugát (metamfetamin-protein)
imobilizovaný v membráně testovací destičky soutěží kompetitivně
s metamfetaminem event. přítomným v testované moči o možnost navázaní
se na omezené množství zlatem značených protilátek nanesených na začátek
testovací membrány. Barevné protilátky (anti-metamfetamin monoclonal antibody)
jsou spolu s močí posunovány po membráně. Pokud v moči
metamfetamin není, dostanou se nenavázané protilátky až k pásu konjugátů v oblasti označené
písmenem T (Test region) a vytvoří zde barevný pruh, což znamená negativní
výsledek testu. Pokud je v moči metamfetamin přítomný, navážou se na něj
protilátky hned na počátku membrány a k pásu konjugátů se již jako volné
nedostanou. V oblasti označené písmenem T proto žádný barevný pás
nevznikne, což znamená pozitivní výsledek testu. Podmínkou vydání výsledku
testu (pozitivní nebo negativní) je přítomnost barevného kontrolního pruhu
v oblasti membrány označené písmenem C (Control region). Ten vytvoří
reakce jiného systému antigen/protilátka přidávaného výrobcem do setu.
Kontrolní barevný pruh potvrzuje, že test byl proveden správně a že je funkční,
tj. že bylo na testovací destičku naneseno dostatečné množství moče a že se moč
dobře nasákla do celé plochy testovací membrány.
Vzhledem k riziku eventuální snahy vyšetřované osoby o ovlivnění výsledku – „falšování“ (pozitivní nález má pro vyšetřovaného většinou různé negativní důsledky) je vhodné dávat přednost těm testovacím systémům, které mimo vlastní testování přítomnosti drogy současně otestují základní spektrum potenciálních pokusů o ovlivnění (naředění moče, přídavek oxidujících, redukujících a bělicích látek, či výraznou úpravu pH moče).
Výhodná je také možnost poskytovaná některými výrobci a to naskenování naexponované destičky vhodným readerem a uložení vytvořeného obrázku v elektronické formě, což umožňuje eventuální pozdější dokladování či jiné využití.
Vzhledem k biologickému poločasu je možné zachytit
metamfetamin v moči po dobu 1 – 4 dnů po aplikaci významné dávky.
Ekonomické náklady
Ekonomické náklady závisí samozřejmě na zvoleném typu a
výrobci testovacích destiček. Rozdílné jsou náklady např. tehdy, když se
použije sólo destička prokazující pouze metamfetamin (amfetamin) (volí se
většinou při cíleném prokazování zneužívání budivých aminů), nebo zda se
aplikuje skupinová destička
s 5 nebo 10 testy současně (volí se při screeningu drog).
Cena jedné destičky se obvykle pohybuje v rozmezí cca 50 – 400 Kč.
Příklady možných zdravotních výkonů VZP:
Název zdravotního výkonu |
Číslo výkonu |
Počet bodů |
Psychotropní látky imunochemicky jednotlivě |
99151 |
428 |
Drogy a léčiva – cílený imunochemický záchyt – STAT |
92135 |
492 |
Drogy a léčiva – cílený imunochemický záchyt. |
92133 |
406 |
Použití pro klinické účely
Průkaz relevantní koncentrace metamfetaminu v moči je
indikován při akutních klinických případech, spojených s atypickým
chováním pacienta, vyvolávajícím podezření na možnost zneužívání metamfetaminu.
Druhou relevantní aplikací je kontrola dodržování léčebného režimu u pacientů
prodělávajících odvykací léčbu.
Literatura
- Czarny, R.J., Hombeck, C.L.: Quantitation of
methamphetamine and amphetamine in urine by capillary GC/MS. J. Anal. Toxicol.,
1989, 13, 257 – 262.
- El Sohly, M.A., Stanford, D.F., Sherman, D., et al.: A procedure for
eliminating interferences from ephedrine and related compounds in the GC/MS
analysis of amphetamine and methamphetamine. J. Anal. Toxicol., 1992, 16, 109 –
111.
Poznámky
Appendixy
Autorské poznámky
Václav Senft (2009-03-30)