Abstrakt
Radioreceptorová analýza je analytická metoda, která
využívá radioindikátorem označenou látku ke stanovení koncentrace biologicky
významné látky. Stanovovanou látkou může být jak receptor biologicky účinné látky,
tak látka samotná. Kvantifikace průběhu reakce je založena na detekci
radioaktivity.
Související informace
Text
RRA využívá obecné reakce ligandu s receptorem
v kompetitivním uspořádání. (R - receptor, L - ligand,
L* - ligand značený radioindikátorem).
Po ustavení termodynamické rovnováhy je nutno z reakční
směsi odstranit nenavázaný ligand. Měřením radioaktivity vázané frakce
radioindikátoru vyhodnocujeme stejný typ analýzy jako v případě RIA
(kompetice).
Receptory je nutno pro danou analýzu izolovat z
cytoplazmy nebo cytoplazmatické membrány vhodných tkání nebo buněk. Nevýhodou
je malá stabilita takto připravených receptorů. Výhodou je velmi úzký vztah
mezi stanovenou koncentrací a biologickou účinností analytu. Receptory byly
využity pro stanovení hCG, LH, FSH, ACTH spíše pro vědecké účely.
Při stanovení koncentrace receptorů ve tkáni využíváme
radioindikátorem značeného ligandu, který přidáváme v rostoucí koncentraci k
biologickému materiálu (suspenzi buněk, tkáňovému cytosolu) až do vysycení
příslušného receptoru indikátorem. Po ustavení termodynamické rovnováhy je
nutno oddělit radioindikátor volný od vázaného na receptor. Matematickou
analýzou průběhu sycení lze stanovit asociační konstantu Ka (kvalitativní
zhodnocení povahy receptoru) a množství receptoru v biologickém materiál
(kvantitativní ohodnocení). Často užívanou metodou je Scatchardova metoda:
B/F
= Ka*(q-B)
Jedná se o rovnicí přímky, kde B/F je poměr vázané a
volné frakce ligandu, Ka je asociační konstant, q je vazebná kapacita a B -
koncentrace vázaného ligandu.
Klinicky je často využíváno stanovení estrogenových a
progesteronových receptorů v karcinomu mléčné žlázy pro stanovení způsobu léčby
tohoto onemocnění. Rovněž lze stanovit insulinové a prolaktinové receptory.
Poznámky
Appendixy
Literatura
Zichová,Hušák,Šafarčík: Vyšetřovací metody in vitro v
nukleární medicíně. IPVZ Brno, 1993
Autorské poznámky
Autor: Šafarčík Kristian
Datum
aktualizace: 26. 11. 1998