OSN-SAbstraktOSN-E

Přítomnost relevantní koncentrace benzodiazepinů a jejich aktivních metabolitů v moči, jako následek zneužívání nebo chybné aplikace (předávkování) léků s obsahem benzodiazepinů, se kvalitativně
(pozitivní – negativní výsledek) prokazuje  pomocí rychlých imunochemických testů, většinou ve formě testovacích destiček.

OSN-SOdkazy na jiné relevantní dokumenty, další informaceOSN-E

Benzodiazepiny

Benzodiazepiny v plazmě

OSN-SPatofyziologické mechanismy ovlivňující koncentraciOSN-E

Nadměrné vylučování moče například po velkém příjmu tekutin nebo po aplikaci diuretik může způsobit pokles koncentrace benzodiazepinů a jejich metabolitů pod cut-off hodnotu a tím negativní nález.
Obráceně nadměrné zakoncentrování moče např. v důsledku omezeného příjmu tekutin, či velkého pocení při vysoké teplotě prostředí může způsobit pozitivní nález.

OSN-STerapeutické mezeOSN-E

OSN-SPřímé následky abnormálních koncentracíOSN-E

Průkaz (pozitivní nález) relevantní koncentrace benzodiazepinů a jejich metabolitů v moči svědčí buď
o zneužívání léků s obsahem benzodiazepinů nebo o náhodných či záměrných chybách v dávkování léků (častější aplikace nebo aplikace významně větších dávek).

OSN-SToxické mezeOSN-E

Za průkaz zneužívání benzodiazepinů či chyby v aplikaci léku se považuje pozitivní nález (objeví se pouze jedna barevná linie a to v kontrolní oblasti C) u testovací destičky většinou nastavené na cut-off koncentraci 300 µg/l.

OSN-SOmezení stanoveníOSN-E

Test je určen pro akutní klinické případy, kdy umožní zvolit adekvátní terapii. Není vhodný pro soudně lékařské a forenzní potřeby, pro které by výsledek testu musel být potvrzen vhodnou kvantitativní
a specifickou metodou založenou například na principu GC/MS.
Při testování „zkušených“ uživatelů drog je nutné bezprostředně kontrolovat odběr vzorku moče kvůli eliminaci eventuálních snah o ovlivnění výsledku například naředěním vzorku moče vodou, přídavkem oxidujících (Savo), redukujících nebo bělících látek či významnou úpravou pH moče. Vyloučena není
ani snaha o záměnu vzorku moče za vzorek spolu pacienta apod. 

OSN-SPoužití ve výpočtech a odvozených parametrechOSN-E

OSN-SZnaky analytické metodyOSN-E

I když se jedná o kvalitativní průkaz, výrobci testovacích destiček většinou specifikují základní analytické znaky (správnost, specifičnost – zkříženou reaktivitu), které určují porovnáváním výsledků testovacích destiček s výsledky získanými referenční metodou založenou např. na principu GC/MS a to v  moči, moči obsahující pouze benzodiazepiny a v moči s současně přidanými jinými relevantními látkami.

Obecný princip používaných imunochemických testovacích destiček:
Test prokazuje přítomnost drogy, tj. benzodiazepinů v moči. Konjugát (benzodiazepin-protein) imobilizovaný v membráně testovací destičky soutěží kompetitivně s benzodiazepiny event. přítomnými v testované moči
o možnost navázaní se na omezené množství zlatem značených protilátek nanesených na začátek testovací membrány. Barevné protilátky (anti-benzodiazepin monoclonal antibody) jsou spolu s močí posunovány po membráně. Pokud v moči  drogy nejsou, dostanou se nenavázané protilátky OSN-Eaž k pásu konjugátů v oblasti označené písmenem T (Test region) a vytvoří zde barevný pruh, což znamená negativní výsledek testu. Pokud jsou v moči benzodiazepiny přítomné, navážou se na ně protilátky hned na počátku membrány a k pásu konjugátů se již jako volné nedostanou. V oblasti označené písmenem T proto žádný barevný pás nevznikne, což znamená pozitivní výsledek testu. Podmínkou vydání výsledku testu (pozitivní nebo negativní) je přítomnost barevného kontrolního pruhu v oblasti membrány označené písmenem C (Control region). Ten vytvoří reakce jiného systému antigen/protilátka přidávaného výrobcem do setu. Kontrolní barevný pruh potvrzuje, že test byl proveden správně a že je funkční, tj. že bylo na testovací destičku naneseno dostatečné množství moče a že se moč dobře nasákla do celé plochy testovací membrány.

Vzhledem k riziku eventuální snahy vyšetřované osoby o ovlivnění výsledku – „falšování“ (pozitivní nález má pro vyšetřovaného většinou různé negativní důsledky) je vhodné dávat přednost těm testovacím systémům, které mimo vlastní testování přítomnosti drogy současně otestují základní spektrum potenciálních pokusů
o ovlivnění (naředění moče, přídavek oxidujících, redukujících a bělicích látek, či výraznou úpravu pH moče).

Výhodná je také možnost poskytovaná některými výrobci a to naskenování naexponované destičky a uložení vytvořeného obrázku v elektronické formě, což umožňuje eventuální pozdější dokladování či jiné využití.

Výrobců testovacích destiček i imunochemických analyzátorů využitelných pro semikvantitativní stanovení benzodiazepinů v moči je celá řada. Protože ale každý výrobce využívá ve svém výrobku jiný systém protilátka- antigen (např. ULTIMED  Drogy - rychlý screening v moči (ULTIMED ) je navázaný na Oxazepam, zatímco Abbott AxSYM  Abbott AxSYM na Nordiazepam) nejsou výsledky zcela srovnatelné, resp. je vždy jiné pořadí citlivosti stanovení pro různé typy benzodiazepinů. Například ULTIMED ukáže pozitivní reakci
u Midazolamu až při koncentraci 12500 µg/l, zatímco AxSYM má u Midazolamu limit pouhých 200 µg/l. Může se proto stát, že u stejného vzorku ukáže jeden systém negativní reakci, zatímco druhý poskytne pozitivní nález. K hodnocení výsledku se proto musí přistupovat opatrně, zvláště v hraniční oblasti koncentrací kolem hladiny pozitivity a pokud je to možné, využít raději více systémů najednou a to nejen imunochemických, ale např. založených na principu GC/MS apod.

OSN-SEkonomické nákladyOSN-E

Ekonomické náklady závisí samozřejmě na zvoleném typu a výrobci testovacích destiček. Rozdílné jsou náklady např. tehdy, když se použije sólo destička prokazující pouze benzodiazepiny (volí se většinou
při cíleném prokazování benzodiazepinů), nebo zda se aplikuje skupinová destička s 5 nebo 10 testy současně (volí se při screeningu drog, tj. když se prověřuje i eventuální přítomnost jiných drog).
Cena jedné destičky se obvykle  pohybuje v rozmezí cca 50 – 400 Kč.

Příklady možných zdravotních výkonů VZP:

Název zdravotního výkonu	Číslo výkonu	Počet bodů
Psychotropní látky imunochemicky jednotlivě	99151	428
Drogy a léčiva – cílený imunochemický záchyt –STAT	92135	492
Drogy a léčiva – cílený imunochemický záchyt.	92133	406

OSN-SPoužití pro klinické účelyOSN-E

Průkaz relevantní koncentrace benzodiazepinů a jejich metabolitů v moči je indikován buď při kontrole zneužívání léků s obsahem benzodiazepinů nebo pro kontrolu eventuálních záměrných či náhodných hrubých chyb v aplikaci léků, např. při léčbě bolesti.

OSN-SLiteraturaOSN-E

- Woods, J.H., Winger, G.: Current benzodiazepine issues. Psychopharmacology, 1995, 118, 107 – 115.

- Barrett, A.M., Walshe, K., Kavanagh, P.V. et al.: A comparison of five commercial immunoassays for the detection of flunitrazepam and other benzodiazepines in urine. Addict. Biol., 1999, 4, 81 – 87.

- Fitzgerald, R.L.:  Analytical toxicology of the benzodiazepines. Therapeutic Drug Monitoring and Toxicology. 1995, 16, 169-186.

- Drummer, O.H.: Methods for the measurements of benzoidazepines in biological samples. J. Chromatogr. B., 1998, 713, 201-225.

OSN-SPoznámkyOSN-E

OSN-SAppendixyOSN-E

OSN-SAutorské poznámkyOSN-E